Formation théorique

Les bases de la culture cellulaire

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  • Sessions :
    • Les 14, 15 et 16 octobre 2020 à Paris
    • Les 14, 15 et 16 juin 2021 à Paris

// De 9h00 à 17h00

  • Durée : 3 journées – 21 heures
  • Pédagogie : Effectif : 12 Personnes

QCM d’évaluation des compétences et échanges avec questions ouvertes
La formation sera sanctionnée par une attestation de formation.

  • Moyens pédagogiques et techniques d’encadrement :

Un vidéoprojecteur // Connexion WIFI haut-débit // Un support de cours couleur // Un paperboard

  • Accessibilité :

Formation accessible au public à mobilité réduite – Adaptation des moyens de la prestation aux personnes en situation de handicap

  • Référence : BMC-01
  • Frais pédagogiques

 1500 € HT / Académiques : 1250 € HT

Déjeuners offerts

  • Formateurs :

Pr. D. Leguellec – Dr. U. Valcourt

  • Public concerné :

Personnels scientifiques et techniques voulant s’initier à la culture cellulaire

  • Prérequis :

Aucun


PROGRAMME

JOUR 1

1. Généralités

2. Théorie cellulaire

 > La cellule, une unité de vie

 > Les énoncés de la théorie cellulaire

 > Le monde vivant

3. Caractéristiques propres aux organismes pluricellulaires

 > Cohésion

 > Spécialisation

 > Conséquences de la spécialisation cellulaire

4. Structure de la cellule eucaryote

 > Membrane plasmique

  – Composition

  – Caractéristiques

 > Noyau

 > Cytosquelette

 > Reticulum endoplasmique

 > Appareil de Golgi

 > Mitochondrie

 > Conséquence de la compartimentalisation cellulaire

5. Propriétés des membranes

 > Endocytose

 – La perméation

 – La phagocytose

 – L’endocytose dépendante de la clathrine

 – L’endocytose dépendante de la cavéoline

 – Les voies d’endocytose

 > Adhérence cellulaire

 – Principes généraux

 – Les molécules d’adhérence

 – L’adhérence focale

 – Les jonctions d’adhérence

 > Communication cellulaire

 – Les différents types de communication

 – Les protéines G

 – Les récepteurs aux protéines G

 – Les voies de signalisation via les RCPG

 – La voie des facteurs de croissance

6. Prolifération, différenciation et mort cellulaire

 > Prolifération cellulaire

 – Le cycle cellulaire

 – L’appareil mitotique

 – La régulation du cycle cellulaire

 > Différenciation cellulaire

 – L’hématopoïèse

 – Vasculogenèse et angiogenèse

 > Mort cellulaire

 – Caractéristiques des cellules apoptotiques

 – Méthodes de mise en évidence des cellules apoptotiques

 – Apoptose et nécrose

 – Les caspases

 – Les voies de l’apoptose

 

JOURS 2 et 3

Introduction

 > Définition

 > Historique (acquisition des méthodes et évolution de la culture cellulaire)

1. Les modalités d’obtention des cellules

 > A partir de cellules en suspension

 > A partir d’explants entiers

 > A partir d’explants dissociés

 – Dissociation mécanique

 – Dissociation enzymatique

 – Dissociation chimique

2. Les systèmes cellulaires

 > Les cultures primaires

 > Les lignées cellulaires à durée de vie limitée – Notion de sénescence cellulaire

 > Les lignées cellulaires continues – Notions d’immortalisation et de transformation

 > Le choix d’une lignée cellulaire

 > La caractérisation des lignées cellulaires

 > Les hybridomes

 > Les cellules souches

 > Les banques de cellules

3. Les systèmes de culture

 > La culture d’organes

 > La culture d’explants

 > La culture organotypique

4. La culture de cellules

 > La culture de cellules en suspension

 > La culture de cellules adhérentes (avec ou sans matrice extracellulaire)

 > La culture en monocouche

 > La culture en trois-dimensions

5. La prolifération cellulaire et le passage

 > La courbe de croissance des cellules

 > Le comptage cellulaire

 > Le repiquage (ou passage) des cellules

 > Le temps de doublement

6. Les conditions de culture

 > Le pH

 > La température

 > L’osmolarité

 > L’oxygène

7. Les milieux de culture

 > Les solutions salines équilibrées

 > Les constituants du milieu de culture

 > Les antibiotiques

 > Le sérum

 > Les milieux définis sans sérum

 > Le renouvellement du milieu de culture

8. La conservation des cellules

 > La congélation

 > La décongélation

 > L’organisation des stocks cellulaires (« cell banking »)

9. Les bonnes pratiques de culture cellulaire

 > Les contaminations (dont mycoplasmes) et la prévention

 > L’environnement de culture (PSM et laboratoire de type L2)

 > Les bonnes pratiques de laboratoire

 – Gestes sous PSM

 – Aspects réglementaires

OBJECTIFS/COMPÉTENCES

  • Savoir expliquer les caractéristiques fondamentales des cellules
  • Définir les caractéristiques propres des organismes vivants
  • Décrire la structure et la fonction des principaux organites intracellulaires
  • Savoir expliquer les propriétés fondamentales des membranes biologiques
  • Avoir connaissance des principes fondamentaux de la prolifération et de la mort cellulaire
  • Connaitre les différents systèmes cellulaires, leurs sources possibles et leurs spécificités
  • Acquérir les principes et les approches permettant la caractérisation, l’entretien, la propagation et la conservation des cellules
  • Différencier les systèmes cellulaires et comparer les différents modes de culture pour critiquerdifférencieridentifier, et choisir le meilleur outil cellulaire et les conditions de culture appropriées en fonction des besoins (nature et durée) du travail expérimental
  • Définirjustifier et recommander un outil cellulaire et son mode de culture en fonction de l’application souhaitée ou des besoins expérimentaux
  • Différencier les grandes étapes méthodologiques pour mettre en œuvre son travail de culture cellulaire dans le bon respect des bonnes pratiques de laboratoire
  • Améliorerconcevoir et appliquer de nouveaux protocoles adaptés à ses projets

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