Les bases de la cytométrie en Flux et du tri cellulaire

• Session :
  • Les 19 & 20 mai 2022 à Paris

// De 9h00 à 17h00

• Durée : 2 journées – 14 heures

• Pédagogie : Effectif : 12 Personnes

Exposés théoriques, études de cas, mises en situation, temps d’échanges. Les apprenants sont en situation d’acteurs de la séance de formation.

Omniprésente, l’interactivité assure la possibilité de progresser en équipe tout en s’appuyant sur les connaissances initiales de chacun des apprenants.

La formation sera sanctionnée par une attestation de formation.

• Moyens pédagogiques et techniques d’encadrement :

Un vidéoprojecteur // Connexion WIFI haut-débit // Un support de cours couleur // Un paperboard

• Accessibilité :

Formation accessible au public à mobilité réduite – Adaptation des moyens de la prestation aux personnes en situation de handicap

• Référence : BMC-02

• Frais pédagogiques – Partie théorique (uniquement sur 2 journées) :

1000 € HT / Académiques : 900 € HT

• Formateur :

Mme M. Andrieu

• Public concerné :

Personnels scientifiques et techniques voulant s’initier à la cytométrie en flux et au tri cellulaire

• Prérequis :

Niveau L2 en Biologie Cellulaire

PROGRAMME

FLUORESCENCE ET FLUOROCHROMES

Rappel sur la fluorescence

Les différents fluorochromes

Caractéristiques spectrales

Propriétés – Comment choisir les fluorochromes ?

PRINCIPE DE LA CYTOMÉTRIE EN FLUX

Système fluidique et optique

Collection et traitement des signaux

REPRÉSENTATION DES DONNÉES

Réglages

APPLICATION À L’ANALYSE DE LA PROLIFÉRATION CELLULAIRE

Analyse monoparamétrique

Elimination des doublets

Détermination des effectifs dans les différentes phases du cycle cellulaire

ANALYSE BIPARAMÉTRIQUE

Analyse de la synthèse d’ADN par incorporation de bromodésoxyuridine

Détection des cellules en mitose

Exemples d’applications.

Quelle méthode choisir ?

TRAVAUX D’APPLICATION INTERACTIFS

JOUR 2 

TRI PAR CYTOMETRIE EN FLUX

Principe du tri par déflection de gouttes

Les différents types de trieurs

Performance et limites du tri par déflexion

Tri cellulaire et bio-sécurité

Préparation de l’échantillon

Alternative ou pré-enrichissement par tri magnétique

Clonage

Exemple de tris

BONNES PRATIQUES CYTOMÉTRIQUES

Préparation du cytomètre et contrôle qualité

Préparation de l’échantillon

Réglages des détecteurs

Réglages des compensations

Réalisation des témoins

Détermination du nombre de cellules à analyser

Règle d’un panel design multi-couleurs

DIFFERENTES APPLICATIONS EN CYTOMETRIE EN FLUX

Phénotypage et cytokines intracellulaires

Viabilité et mort cellulaire

Détection de l’apoptose

Flux calcique

Dosages multiplex de protéines type luminex.

TRAVAUX D’APPLICATION INTERACTIFS

REVUE DES NOUVEAUX OUTILS EN CYTOMETRIE DE FLUX

Cytomètrie à focalisation acoustique

Cytomètrie spectrale

Cytométrie de masse

L’analyse non supervisée (SPADE …)

OBJECTIFS/COMPETENCES

• Connaître les concepts de la cytométrie en flux : analyse et tri
• Catégoriser les étapes majeures et les bonnes pratiques : de la préparation des échantillons à l’interprétation des résultats
• Identifier les applications principales
• Comprendre les avancées technologiques
• Structurer la capacité d’initiative