Formation théorique & Pratique

CRISPR/Cas9: une rupture en génie génétique

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> Sessions :

  • Le 25 mai 2018 à Lyon
  • Le 4 octobre 2018 à Paris

// De 9h00 à 17h00

> Durée :

1 journée – 7 heures

> Pédagogie :

Effectif : 14 Personnes

Remise de support de cours
La formation sera sanctionnée par une attestation de formation.

> Référence : BMC-26

  • Frais pédagogiques : 500 € HT / Académiques : 450 € HT
  • Intervenants :  Dr. F. Flamant et Dr S. Markossian
  • Public concerné : Personnels scientifiques et techniques voulant s’initier à la technologie CRISPR/Cas9

PROGRAMME

Partie 1 – Présentation générale de la méthode CRISPR/cas9

 

Généralités :

Apercu général des méthodes du génie génétique.

CRISPR/Cas9 : détourner une défense bactérienne naturelle pour l’édition génétique.

L’avènement de CRISPR/Cas9 : pourquoi c’est une révolution.

Déclinaison de la méthode pour des utilisations variées.

 

Mise en œuvre :

Paramètres définissant l’ efficacité de l’édition génétique

Paramètres définissant la spécificité de l’édition génétique

Prédictions bioinformatiques et optimisation de la conception des ARN guides.

Prise en compte a posteriori des mutations imprévues « off-target »

Favoriser  la mutagénèse dirigée par rapport à l’édition génétique aléatoire.

Optimisation de la conception des oligonucléotides matrices.

 

Développements actuels et futures

Modification des propriétés de la nucléase Cas9

Les autres nucléases ARN dépendantes.

Edition épigénétique. Utilisation de Cas9 comme plate-forme de développement.

Criblages à grande échelle.

 

Partie 2 – Travaux Tutorés

Considérations pratiques pour le design des ARN guides et des oligonucléotides matrices (ssODN).

TP: Design d’un projet d’invalidation génique (via la voie NHEJ).
TP: Design d’un projet de mutations ponctuelles (via la voie HDR).

 

 

OBJECTIFS

  • Connaitre les mécanismes fondamentaux d’édition génomique.
  • Connaitre les principales possibilités offertes par la méthode CRISPR/Cas9
  • Connaitre les limites techniques de la méthode CRISPR/Cas9 et les contrôles nécessaires à sa mise en œuvre.
  • Savoir concevoir un protocole adapté à son projet, et choisir entre la voie NHEJ ou HDR
  • Etre capable de designer des ARN guides et des oligonucléotides matrice
  • Pouvoir suivre et évaluer les évolutions futures de la technologie.

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