- Session : En Intra, sur demande
- // De 9h00 à 17h00
- Durée : 2 journées – 14 heures
- Pédagogie : Effectif : 12 Personnes
Exercices pratiques et étude de cas.
Remise de support de cours
La formation sera sanctionnée par une attestation de formation. - Les moyens pédagogiques techniques et d’encadrement : Un videoprojecteur // Une connexion wifi haut débit // Un paperboard // Un support de cours couleur // Un ordinateur individuel (un par auditeur)
- Frais pédagogiques : Sur devis
- Intervenant : Mme A. Armezzani
- Public concerné : Personnels scientifiques et techniques voulant être autonome sur la technique de la PCR.
- Référence : BMC-13
- Les compétences visées
A l’issu de cette formation sur la PCR, les auditeurs seront autonomes sur n’importe quel type de PCR, seront capable d’élaborer un protocole et d’analyser de manière objective l’ensemble des résultats obtenus. Ils auront l’ensemble des éléments nécessaires à l’élaboration d’uns stratégie qui leur fera gagner du temps et améliorera la robustesse et la reproductibilité de leurs expériences.
- Les prérequis
Il n’y a pas de pré-requis particulier, outre un niveau en Biologie Moléculaire minimum (niveau BTS/IUT) permettant de comprendre les mécanismes d’hybridation et de fusion de l’ADN
- Moyens permettant de suivre l’exécution de l’action et d’en apprécier les résultats
L’exécution de l’action est suivi par la signature d’émargement par 1/2 journée. Les résultats sont appréciés à l’issue de la formation à travers un entretien avec le responsable formation.
- Modalités d’évaluation
La formatrice interrogera les auditeurs à la fin de chaque chapitre et une évaluation sous forme d’exercices d’applications et d’un questionnaire seront réalisés en fin de formation.
Programme et déroulé de la formation
Définition de la PCR
Les acteurs principaux de la PCR
Les échantillons d’ADN
L’ADN génomique
L’ADN plasmidique
Les amorces sens et anti sens
Choix des amorces
Température d’hybridation et température de fusion
Spécificité d’appariement et stringence d’hybridation
Les ADN polymérase
Caractéristiques et propriétés
Les différentes ADN polymérases utilisées en PCR
Le autres composants de le tampon de PCR
Le chlorure de magnésium
Les deoxynucleotide triphosphates
Le thermo cycler
Applications de la PCR
LA PCR en pratique
Commander les amorces
Diluer les amorces
Choisir la bonne Taq polymérase
Choisir le programme du thermo cycler
Analyser et interpréter les résultats
Résoudre d’éventuels problèmes
OBJECTIFS
- Présenter tous les paramètres permettant de réaliser une PCR en en maitrisant l’ensemble des étapes
- Souligner l’impact du choix des amorces sur les résultats
- Trouver une bonne stratégie pour gagner beaucoup de temps et d’efficacité